产品货号：
WH0017
中文名称：
口腔拭子基因组DNA提取试剂盒（离心吸附柱法)
英文名称：
Extraction kit for genomic DNA from oral swab
产品规格：
50次|200次
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本试剂盒提供一种简单稳定的方法，在90min内分离纯化得到基因组DNA。试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统，可以稳定高效的纯化得到口腔拭子样本的基因组DNA。使用本试剂盒得到的DNA可提供基因检测或者组织分型足够用的DNA，满足后续实验的要求。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。
产品特点：
·采用硅胶膜原理，简单、快速从口腔拭子中提取基因组DNA。
·提取的基因组DNA片段大、纯度高。
·单个拭子样本得率达到0.5-3.5μg。
试剂盒组成：
保存条件：室温（15-25℃）干燥条件下，可保存12个月，更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保存条件下，若溶液产生沉淀，使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间，必要时可在37℃水浴中预热10 min，以溶解沉淀。
选配试剂：RNase A（100mg/ml）（目录号：WH0217）；Carrier RNA（目录号：RT416）
注意事项：（请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项)
1．若缓冲液GA或GB中有沉淀，可在37℃水浴中重新溶解，摇匀后使用。
2．所有离心步骤均使用台式离心机，室温下离心。
使用方法：
使用前请先在缓冲液GD和漂洗液PW中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。
取样方式：使用棉签在面颊内擦拭10次。
注意：为了保证样本不被食物或者饮料污染，取样前30 min内请勿进食和饮水。
1．处理材料：
将在面颊内擦拭过的棉签转置于2 ml离心管中，用剪刀将棉签部分从其杆上剪下，加入400μl缓冲液GA。
注意：如果需要去除RNA，可加入4 μl RNase A（100mg/ml）溶液（客户自备，目录号：WH0217），振荡15 sec，室温放置5 min。
2．加入20 μl Proteinase K溶液，涡旋10 sec混匀，56℃放置60 min，其间每15 min涡旋混匀数次。
3．加入400μl缓冲液GB，充分颠倒混匀，70℃放置10 min。此时溶液应变清亮，简短离心以去除管盖内壁的液滴，然后挤压去除拭子，将尽可能多的裂解液转移至新的离心管中。
注意1：加入缓冲液GB时可能会产生白色沉淀，一般70℃放置时会消失，不会影响后续实验。如溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻底，可能导致提取DNA量少和提取出的DNA不纯。
注意2：如果由于拭子上细胞数少导致提取的基因组DNA少于1μg，可以在添加缓冲液GB的同时添加Carrier RNA（客户自备，目录号：RT416）。
4．加200 μl无水乙醇，充分颠倒混匀，简短离心以去除管盖内壁的液滴。
注意：加入无水乙醇后可能会出现絮状沉淀，但不影响DNA提取。
5．将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CR2中（吸附柱CR2放入收集管中），12000rpm （~13400×g)离心30 sec，倒掉收集管中的废液，将吸附柱CR2放回收集管中。
6．向吸附柱CR2中加入500 μl缓冲液GD（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12000rpm（~13400×g)离心30 sec，倒掉收集管中的废液，将吸附柱CR2放回收集管中。
7．向吸附柱CR2中加入600 μl漂洗液PW（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12000rpm（~13400×g)离心30 sec，倒掉收集管中的废液，将吸附柱CR2放回收集管。
8．重复操作步骤7。
9．12000rpm （~13400×g)离心2 min，倒掉废液。将吸附柱CR2室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。
10．将吸附柱CR2转入一个干净的离心管中，向吸附膜中间位置悬空滴加20-50 μl洗脱缓冲液TB，室温放置2-5 min，12000rpm （~13400×g)离心2 min。
注意：洗脱缓冲液体积不应少于20 μl，体积过小影响回收效率。为增加基因组DNA的得率，可将离心得到的溶液再加入吸附柱CR2中，室温放置2 min，12000rpm（~13400×g)离心2 min。洗脱液的pH对于洗脱效率有很大影响。若用ddH2O做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率；且DNA产物应保存在-20℃，以防DNA降解。
DNA浓度及纯度检测：
1．得到的基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。回收得到的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。
2．DNA应在OD260处有显著吸收峰，OD260值为1相当于大约50 μg/ml双链DNA、40 μg/ml单链DNA。
3．OD260/OD280比值应为1.7-1.9，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用ddH2O，比值会偏低，因为pH值和离子存在会影响光吸收值，但并不表示纯度低。
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产品特点：
·采用硅胶膜原理，简单、快速从口腔拭子中提取基因组DNA。
·提取的基因组DNA片段大、纯度高。
·单个拭子样本得率达到0.5-3.5μg。
试剂盒组成：
| 组分 | 50T | 200T |
| 缓冲液GA | 30ml | 2×50 ml |
| 缓冲液GB | 30ml | 2×50 ml |
| 缓冲液GD | 13 ml | 52 ml |
| 漂洗液PW | 15 ml | 50 ml |
| 洗脱缓冲液TB | 15 ml | 30ml |
| Proteinase K | 1 ml | 4×1 ml |
| RNase-Free吸附柱CR2 | 50个 | 200个 |
| 收集管（2 ml) | 50个 | 200个 |
| 离心管（1.5 ml) | 50个 | 200个 |
保存条件：室温（15-25℃）干燥条件下，可保存12个月，更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保存条件下，若溶液产生沉淀，使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间，必要时可在37℃水浴中预热10 min，以溶解沉淀。
选配试剂：RNase A（100mg/ml）（目录号：WH0217）；Carrier RNA（目录号：RT416）
注意事项：（请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项)
1．若缓冲液GA或GB中有沉淀，可在37℃水浴中重新溶解，摇匀后使用。
2．所有离心步骤均使用台式离心机，室温下离心。
使用方法：
使用前请先在缓冲液GD和漂洗液PW中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。
取样方式：使用棉签在面颊内擦拭10次。
注意：为了保证样本不被食物或者饮料污染，取样前30 min内请勿进食和饮水。
1．处理材料：
将在面颊内擦拭过的棉签转置于2 ml离心管中，用剪刀将棉签部分从其杆上剪下，加入400μl缓冲液GA。
注意：如果需要去除RNA，可加入4 μl RNase A（100mg/ml）溶液（客户自备，目录号：WH0217），振荡15 sec，室温放置5 min。
2．加入20 μl Proteinase K溶液，涡旋10 sec混匀，56℃放置60 min，其间每15 min涡旋混匀数次。
3．加入400μl缓冲液GB，充分颠倒混匀，70℃放置10 min。此时溶液应变清亮，简短离心以去除管盖内壁的液滴，然后挤压去除拭子，将尽可能多的裂解液转移至新的离心管中。
注意1：加入缓冲液GB时可能会产生白色沉淀，一般70℃放置时会消失，不会影响后续实验。如溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻底，可能导致提取DNA量少和提取出的DNA不纯。
注意2：如果由于拭子上细胞数少导致提取的基因组DNA少于1μg，可以在添加缓冲液GB的同时添加Carrier RNA（客户自备，目录号：RT416）。
4．加200 μl无水乙醇，充分颠倒混匀，简短离心以去除管盖内壁的液滴。
注意：加入无水乙醇后可能会出现絮状沉淀，但不影响DNA提取。
5．将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CR2中（吸附柱CR2放入收集管中），12000rpm （~13400×g)离心30 sec，倒掉收集管中的废液，将吸附柱CR2放回收集管中。
6．向吸附柱CR2中加入500 μl缓冲液GD（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12000rpm（~13400×g)离心30 sec，倒掉收集管中的废液，将吸附柱CR2放回收集管中。
7．向吸附柱CR2中加入600 μl漂洗液PW（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12000rpm（~13400×g)离心30 sec，倒掉收集管中的废液，将吸附柱CR2放回收集管。
8．重复操作步骤7。
9．12000rpm （~13400×g)离心2 min，倒掉废液。将吸附柱CR2室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。
10．将吸附柱CR2转入一个干净的离心管中，向吸附膜中间位置悬空滴加20-50 μl洗脱缓冲液TB，室温放置2-5 min，12000rpm （~13400×g)离心2 min。
注意：洗脱缓冲液体积不应少于20 μl，体积过小影响回收效率。为增加基因组DNA的得率，可将离心得到的溶液再加入吸附柱CR2中，室温放置2 min，12000rpm（~13400×g)离心2 min。洗脱液的pH对于洗脱效率有很大影响。若用ddH2O做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率；且DNA产物应保存在-20℃，以防DNA降解。
DNA浓度及纯度检测：
1．得到的基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。回收得到的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。
2．DNA应在OD260处有显著吸收峰，OD260值为1相当于大约50 μg/ml双链DNA、40 μg/ml单链DNA。
3．OD260/OD280比值应为1.7-1.9，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用ddH2O，比值会偏低，因为pH值和离子存在会影响光吸收值，但并不表示纯度低。
相关搜索：口腔拭子基因组DNA提取试剂盒（离心吸附柱法)，口腔拭子gDNA提取试剂盒，Extraction kit for genomic DNA from oral swab